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基于核酸適配體/苝酰亞胺的非標(biāo)記熒光技術(shù)檢測(cè)甲基苯丙胺

張?zhí)煸? 郝紅霞; 楊瑞琴 中國(guó)人民公安大學(xué)刑事科學(xué)技術(shù)學(xué)院; 北京100038; 證據(jù)科學(xué)教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室(中國(guó)政法大學(xué)); 2011司法文明協(xié)同創(chuàng)新中心; 北京100088
  • 核酸適配體
  • 水溶性苝酰亞胺衍生物
  • 甲基苯丙胺

摘要:運(yùn)用能特異性識(shí)別甲基苯丙胺的核酸適配體作為識(shí)別元件,通過(guò)合成水溶性苝酰亞胺衍生物(PBIs)作為熒光探針,構(gòu)建了一種非標(biāo)記的適配體熒光檢測(cè)方法,用于高靈敏度、高選擇性檢測(cè)甲基苯丙胺。當(dāng)沒(méi)有靶標(biāo)甲基苯丙胺時(shí),Exo I將卷曲的適配體降解成寡核苷酸片段,探針PBIs不發(fā)生聚集,體系熒光信號(hào)基本不變;當(dāng)甲基苯丙胺存在時(shí),與適配體結(jié)合形成穩(wěn)定結(jié)構(gòu),從而抵抗了Exo I的降解作用,帶負(fù)電的適配體/甲基苯丙胺復(fù)合物使探針PBIs發(fā)生聚集,由于聚集誘導(dǎo)猝滅效應(yīng),體系熒光強(qiáng)度驟降。基于以上原理,實(shí)現(xiàn)了甲基苯丙胺的高靈敏度、選擇性檢測(cè)。探針PBIs濃度為5μmol/L、適配體濃度0. 8μmol/L、Exo I酶切時(shí)間40 min為檢測(cè)甲基苯丙胺的最佳條件,該方法的檢出限為436. 7 nmol/L。

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