摘要：目的構(gòu)建表達(dá)甲型HIN1流感病毒血凝素（hemagglutinin，HA）抗原的DNA疫苗，并在小鼠中測試其免疫原性。方法運(yùn)用人密碼子優(yōu)化技術(shù)合成甲型HIN1流感病毒HA序列，并轉(zhuǎn)移至DNA疫苗載體，用Westernblotting檢測其表達(dá)效率。采用單純隨機(jī)抽樣方法把BALB／c小鼠分成DNA疫苗組和對照組。用DNA疫苗免疫疫苗組小鼠，免疫后取小鼠血清和脾細(xì)胞，分別用ELISA方法和酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)試驗(yàn)（ELISPOT）方法檢測血清中的特異性抗體應(yīng)答和脾細(xì)胞中的特異性T細(xì)胞應(yīng)答，最后用血凝抑制（hemagglutination inhibition，HI）試驗(yàn)和假病毒中和試驗(yàn)分別檢測血清中的HI抗體和中和抗體應(yīng)答。采用t檢驗(yàn)作兩組之間比較。結(jié)果所構(gòu)建的DNA疫苗能夠高效表達(dá)HA蛋白。免疫小鼠后能有效誘導(dǎo)T細(xì)胞免疫應(yīng)答[429．0±113．4斑點(diǎn)形成細(xì)胞（spot—forming cell，SFC）／10。脾細(xì)胞]，血清結(jié)合抗體滴度為16127．0±2698．0，HI抗體滴度為100．8±16．9，所有數(shù)據(jù)均顯著高于載體對照（分別為t=3．863，P=0．0042；t=5．734，P=0．0002；t=6．018，P=0．0001）。DNA疫苗能活化產(chǎn)生高水平的針對同源H1N1毒株的中和抗體，但不能活化產(chǎn)生針對異源H1N1毒株的中和抗體。結(jié)論本研究構(gòu)建的DNA疫苗有較好的免疫原性，并能誘導(dǎo)一定水平的保護(hù)性抗體產(chǎn)生。