摘要：目的:構(gòu)建表達(dá)Cyto-Keima蛋白的宮頸癌細(xì)胞系HeLa及小鼠原代神經(jīng)元,作為新的細(xì)胞自噬評價體系。方法:包裝pCDH-Cyto-Keima慢病毒,感染HeLa細(xì)胞和小鼠原代神經(jīng)元,采用激光共聚焦熒光顯微鏡觀察Cyto-Kei.ma蛋白在HeLa細(xì)胞和小鼠原代神經(jīng)元中的表達(dá)情況,用已知自噬誘導(dǎo)劑和抑制劑處理細(xì)胞,檢測該體系對自噬的響應(yīng)。結(jié)果:感染Cyto-Keima慢病毒48h后,通過激光共聚焦熒光顯微鏡觀察,細(xì)胞表達(dá)Cyto-Keima蛋白;在Earle平衡鹽溶液或自噬誘導(dǎo)劑雷帕霉素處理下,HeLa-Cyto-Keima細(xì)胞和Cyto-Keima原代神經(jīng)元自噬水平明顯增強(qiáng);在自噬抑制劑巴弗洛霉素A1和氯喹處理下,細(xì)胞自噬水平明顯降低。結(jié)論:構(gòu)建了基于Cyto-Keima蛋白的細(xì)胞自噬評價體系。