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肉葡萄球菌電轉(zhuǎn)化條件的優(yōu)化
張變強(qiáng); 唐巧巧; 柯靈超; 張健; 王德培; 朱燕; 高強(qiáng) 工業(yè)發(fā)酵微生物教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室; 天津科技大學(xué)生物工程學(xué)院; 天津300457; 天津科技大學(xué)后勤管理處; 天津300457
- 肉葡萄球菌
- 電轉(zhuǎn)化
- 轉(zhuǎn)化效率
摘要：肉葡萄球菌(Staphylococcus carnosus)作為革蘭氏陽(yáng)性菌,遺傳轉(zhuǎn)化難度大是限制其遺傳操作的主要因素之一.通過(guò)優(yōu)化菌體生長(zhǎng)狀態(tài)、電擊緩沖液、復(fù)蘇培養(yǎng)基組分等條件,分析了各因素對(duì)S.carnosusTM300電轉(zhuǎn)化效率的影響.研究表明:S.carnosusTM300在B2生長(zhǎng)培養(yǎng)基中生長(zhǎng)到A578=0.6時(shí)收集菌體,使用GS電擊緩沖液洗滌菌體制備感受態(tài)細(xì)胞,在電壓2450V、間距2mm電轉(zhuǎn)杯條件下進(jìn)行電轉(zhuǎn)化,電擊后立即加入LBM復(fù)蘇培養(yǎng)基,37℃、180r/min搖床復(fù)蘇培養(yǎng)4h,可以獲得的最佳電轉(zhuǎn)化效率為5.95×10^3μg^-1.
- 肉葡萄球菌
- 電轉(zhuǎn)化
- 轉(zhuǎn)化效率
摘要：肉葡萄球菌(Staphylococcus carnosus)作為革蘭氏陽(yáng)性菌,遺傳轉(zhuǎn)化難度大是限制其遺傳操作的主要因素之一.通過(guò)優(yōu)化菌體生長(zhǎng)狀態(tài)、電擊緩沖液、復(fù)蘇培養(yǎng)基組分等條件,分析了各因素對(duì)S.carnosusTM300電轉(zhuǎn)化效率的影響.研究表明:S.carnosusTM300在B2生長(zhǎng)培養(yǎng)基中生長(zhǎng)到A578=0.6時(shí)收集菌體,使用GS電擊緩沖液洗滌菌體制備感受態(tài)細(xì)胞,在電壓2450V、間距2mm電轉(zhuǎn)杯條件下進(jìn)行電轉(zhuǎn)化,電擊后立即加入LBM復(fù)蘇培養(yǎng)基,37℃、180r/min搖床復(fù)蘇培養(yǎng)4h,可以獲得的最佳電轉(zhuǎn)化效率為5.95×10^3μg^-1.
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