摘要：目的:揭示原芹菜素與其糖苷之間的拮抗作用,并在分子水平上闡明這兩個化合物對于PDK-1介導(dǎo)的AKT磷酸化的拮抗作用。方法:首先建立普通針毛蕨的HPLC指紋圖譜,并確定目標(biāo)化合物含量。而后通過免疫印跡實(shí)驗(yàn),采用組合模式給藥,證實(shí)了這兩個化合物對于PDK-1介導(dǎo)的AKT磷酸化的拮抗作用。再后通過CETSA實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步證實(shí)了這兩個化合物對PDK-1蛋白的競爭性結(jié)合行為,最后采用分子對接給予這種拮抗作用圖像化的解釋。結(jié)果:普通針毛蕨提取物中原芹菜素和原芹菜素葡萄糖苷的摩爾濃度分布為1.249μmol·L^-1和0.928μmol·L^-1。在該濃度下原芹菜素的抗腫瘤增殖效果可以被原芹菜素葡萄糖苷所抑制,且原芹菜素所介導(dǎo)的PDK-1下調(diào)也可以被原芹菜素葡萄糖苷所拮抗。同時CETSA實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步證實(shí)了這個兩個化合物與PDK-1的競爭性結(jié)合。結(jié)論:本研究揭示了一個原芹菜素的拮抗因素,并為原芹菜素葡萄糖苷含量控制提供了依據(jù)。