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雄激素受體干預(yù)對包皮成纖維細胞Mafb基因表達的影響

王紹; 周玥; 向涵; 劉星; 沈煉桔; 龍春蘭; 張德迎; 何大維; 林濤; 魏光輝 重慶醫(yī)科大學(xué)附屬兒童醫(yī)院泌尿外科、兒童泌尿生殖發(fā)育與組織工程重慶市重點實驗室、兒童發(fā)育疾病研究教育部重點實驗室、兒童發(fā)育重大疾病國家國際科技合作基地、兒科學(xué)重慶市重點實驗室; 重慶400014
  • mafb
  • 雙氫睪酮
  • 氟他胺
  • 成纖維細胞

摘要:目的:探討雙氫睪酮(dihydrotestosterone,DHT)與氟他胺(flutamide,Flu)對Mafb基因表達的影響。方法:利用原代培養(yǎng)的正常兒童包皮成纖維細胞株,分別采取不同濃度DHT與Flu干預(yù),通過RT-PCR、免疫細胞熒光和Western blot檢測Mafb的轉(zhuǎn)錄表達情況。結(jié)果:在DHT濃度為3.0×10^-8mol/L與3.0×10^-6mol/L干預(yù)條件下,Mafb mRNA的表達量分別為0.372±0.003、0.594±0.045,與正常組(0.444±0.007)相比,DHT 3.0×10^-6mol/L組明顯上調(diào)(P=0.005),而DHT 3.0×10^-8mol/L組上調(diào)差異不明顯(P=0.145);Flu 15μmol/L干預(yù)條件下,Mafb mRNA的表達量為0.221±0.013,與正常組相比,表達量明顯下降(P=0.000)。細胞免疫熒光分析表明,與正常對照組相比(0.027±0.006),DHT 3.0×10^-8mol/L組(0.046±0.004)、3.0×10^-6mol/L組(0.076±0.003)Mafb表達量明顯上調(diào)(P=0.010,P=0.000),而Flu組(0.006±0.002)明顯下調(diào)(P=0.009)。同樣Western blot結(jié)果顯示,較對照組蛋白水平(0.163±0.001)相比,DHT 3.0×10^-8mol/L組(0.146±0.001)上調(diào)無統(tǒng)計學(xué)差異(P=0.960),DHT 3.0×10^-6mol/L組(0.598±0.087)Mafb表達量上調(diào)差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.000),而Flu組(0.066±0.002)明顯下調(diào)(P=0.040)。結(jié)論:在體外培養(yǎng)包皮成纖維細胞株中,Mafb基因的表達受DHT和Flu的調(diào)控。Mafb作為雄激素受體下游調(diào)控蛋白,可能是雄激素受體信號通路促進尿道發(fā)育的重要機制。

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