序論：寫作是一種深度的自我表達。它要求我們深入探索自己的思想和情感，挖掘那些隱藏在內心深處的真相，好投稿為您帶來了七篇提取工藝論文范文，愿它們成為您寫作過程中的靈感催化劑，助力您的創作。

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1．1供試品溶液的制備取酸漿粗多糖置于50mL錐形瓶中，加適量純水，沸水浴使溶解，趁熱過濾，并用熱水洗殘渣，將洗液與錐形瓶中溶液混合，轉移至100mL容量瓶中，并稀釋至刻度，搖勻即得。

1．2葡萄糖標準曲線繪制精密稱取葡萄糖10．31mg，置于10mL容量瓶中，加適量水溶解，并稀釋至刻度，搖勻。精密吸取0．0、0．1、0．2、0．4、0．6、0．8mL于25mL比色管，分別加水補1．0mL。上述溶液分別加3，5-二硝基水楊酸試液1．5mL，于沸水浴中加熱5min，流水冷卻，加水稀釋至25mL刻度。以相應溶液為空白，在520nm處測定吸收度。以吸光度為縱坐標，濃度為橫坐標，繪制標準曲線。

1．3酸漿果實中多糖含量的測定精密量取供試品溶液2．5mL，置于50mL錐形瓶中，加水2．5mL，加6mol/L鹽酸溶液5mL，在沸水浴中加熱30min，用流水冷卻后加酚酞指示液1滴，用40%氫氧化鈉溶液調節至微紅色，轉移至25mL容量瓶中，加水至刻度，搖勻，即得總糖溶液。精密量取供試品溶液5mL，置于10mL容量瓶中，加酚酞指示液1滴，用40%氫氧化鈉溶液調節至微紅色，加水至刻度，搖勻，即得單糖溶液。精密量取上述總糖溶液和單糖溶液1mL，分別置于10mL具塞刻度試管中，加純水至2mL，分別精密加入3，5-二硝基水楊酸試液2mL，混勻，在100℃水浴中加熱5min，取出，立即用冰水浴冷卻至室溫，加水3mL搖勻。用相應的試劑作空白，照分光光度法在520nm處依法顯色，測定吸光度，從標準曲線回歸方程中計算出總糖和單糖濃度，由總糖含量減去單糖含量，即得多糖的含量。

1．4單因素實驗設計選擇料液比、醇沉濃度、提取時間、提取次數4個影響因素進行單因素實驗，其中料液比分別為1∶30、1∶40、1∶50、1∶60、1∶70，醇沉濃度分別為55%、65%、75%、85%、95%，提取時間分別為1h、1．5h、2h、2．5h、3h，提取次數分別為1、2、3次。

1．5正交實驗設計根據相關文獻及單因素實驗，選擇料液比、醇沉濃度、提取時間、提取次數4個影響因素，每個因素取3個水平，以多糖提取率為主要考察指標，選用L9(34)正交表進行實驗。

2結果

以粗多糖的含量為指標，在料液比為1∶60、乙醇濃度為85%、提取時間2．5h、提取次數為2次時，提取出的多糖含量最高。單因素實驗設計的因素水平見表1，正交實驗表如表2。按照上述最佳提取工藝提取條件，對一組樣品進行驗證，測定多糖的提取含量為10．5353、10．5533、10．7517、10．5866、10．6721mg/g。

3討論

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1.1材料

供試山茱萸干燥果實產于安徽,購于廣州中醫藥大學大藥房有限公司中藥飲片廠，將山茱萸原料粉碎,置干燥器中備用。

1.2試劑

濃硫酸，質量分數為6%的苯酚(分析純重蒸餾試劑),質量分數為95%的乙醇,氯仿,正丁醇,葡萄糖,氯化鈉等,以上試劑均為分析純。

1.3儀器

核酸蛋白測定儀,德國Hettich公司；自動收樣器,美國Whaters公司；AlphaI-2型真空凍干機,德國Christ公司；電熱恒溫水槽(DK8D型),上海森信實驗儀器有限公司；高速冷凍離心機,德國Hettich公司。

1.4方法

1.4.1粗多糖樣品的制備

山茱萸干粉,不同條件加熱(攪拌)浸提,離心,上清液加熱濃縮至體積的1/4,95%乙醇沉淀至75%(V/V)，4℃靜置過夜,離心,取沉淀,丙酮乙醚無水乙醇溶劑系統反復沖洗,真空冷凍干燥得到粗多糖樣品。

1.4.2山茱萸多糖含量測定［4］

采用苯酚-硫酸法,以葡萄糖為標準單糖制作標準曲線，得回歸方程為：Y=0.0077X+0.0257,R2=0.9995［多糖的量（μg）為橫坐標，光密度值為縱坐標］。

準確稱取粗多糖樣品6mg,加蒸餾水至50ml,配成120μg/ml的樣品溶液。吸取樣品液1.0ml，按標準曲線同法操作，測光密度，以標準曲線計算總糖含量。

1.4.3得率的計算山茱萸多糖得率(%)=山茱萸粗多糖樣品中總糖含量(g)/山茱萸原料質量(g)×100%。

1.4.4單因素分析及正交實驗

本實驗選取溫度、時間、料液比、pH值這4個因素進行分析,并從中選取3個因素水平根據單因素分析結果,采用L9(34)表做正交實驗,以多糖提取率作為衡量提取效率的客觀指標，以確定最佳提取工藝。

1.4.5山茱萸多糖的分離純化

按最佳提取工藝流程,將提取的紅褐色山茱萸粗多糖(ZA)復溶于水,用Sevag［5］法除蛋白,重復3次,加95%乙醇至30%,離心,得到粗多糖(ZB),上清液繼續加95%乙醇至60%,4℃靜置過夜,丙酮-乙醚-無水乙醇溶劑系統反復沖洗,真空冷凍干燥,得到粗多糖樣品(ZC)。稱取樣品AC200mg,溶于100ml蒸餾水中,然后加到DEAE-cellulose-52離子交換柱洗脫(2.6cm×26cm)上,依次用蒸餾水及0.1，0.3，0.5，0.8，1.0mol/L的NaCl水溶液洗脫,多功能電子蠕動泵控制流速為1ml/min,用自動收集儀收集,苯酚-硫酸法跟蹤檢測多糖,合并各吸收峰的洗脫液,蒸餾水透析3d，旋轉蒸發儀濃縮,冷凍干燥,得到山茱萸多糖的兩個分離產物S1和S2。

1.4.6純度測定

凝膠色譜法:用0.05mol/LNaCl溶液充分溶脹葡聚糖凝膠SephadexG200,超聲脫氣,攪拌均勻,沿玻璃棒小心緩慢地加入到柱中,同時用洗耳球敲擊柱壁,使填料沉降均勻、緊密。柱型(2.6cm×33cm)，裝柱完成后,用0.05mol/L的NaCl溶液平衡48h。稱取經DEAE柱分離得到的多糖樣品20mg,溶于0.05mol/L的NaCl溶液中,加入到SephadexG-200凝膠柱中,洗脫液控制流速為0.1ml/min,用自動收集儀收集洗脫組分,2ml/管,苯酚-硫酸法跟蹤檢測多糖,觀察吸收峰形狀,若峰對稱,說明樣品較純,若峰形不對稱,說明樣品不純,需要進一步分離純化,方法同上。

1.5山茱萸多糖理化性質

1.5.1物理性質

山茱萸多糖的顏色、形狀、水溶性、有機溶劑的溶解性等。

1.5.2化學性質［6］

Molish反應,硫酸-苯酚反應,Fehling試劑反應,碘-碘化鉀反應，三氯化鐵反應。

1.5.3蛋白含量測定考馬斯亮藍法:以牛血清白蛋白制備標準蛋白質溶液，以OD595值為縱坐標,蛋白的量為橫坐標做標準曲線：Y=0.0039X+0.0032，R2=0.9993。

1.5.4多糖基本元素分析

通過CHNS/O元素分析儀來確定純化后山茱萸多糖中基本元素的組成。

2結果

2.1山茱萸多糖提取條件的單因素分析

2.1.1乙醇添加量山茱萸多糖得率隨乙醇添加量增加而增加,乙醇添加倍數達到3倍時，多糖沉淀完全,所以本研究以下的實驗均選用3倍體積乙醇沉淀多糖。見圖1。

2.1.2提取溫度溫度是影響多糖得率的重要因素。不同溫度(40，50，60，70，80，90℃)對多糖得率產生影響:多糖得率隨溫度升高而升高,40～60℃升高較慢60～80℃較快,80℃達到最高值,因此確定正交實驗溫度3水平為60，70，80℃。見圖2。

2.1.3提取時間提取時間是影響多糖得率的另一個重要因素,不同時間(1，2，3，4，5，6h)對多糖得率的影響如圖3所示。多糖得率隨時間升高而升高,1～3h升高較慢,3～5h升高較快,因此確定正交實驗提取時間水平為3，4，5h。見圖3。

2.1.4加水量不同加水量(30，40，50，60，70，80倍)對多糖得率的影響如圖4所示。多糖得率隨加水量增加而增加。30～50倍水升高較慢,60～80倍水升高較快,因此確定正交實驗加水量的水平為60，70，80倍水。見圖4。

2.1.5pH值不同pH值(1～7)對多糖得率的影響見圖5。在酸性條件下多糖得率明顯降低,pH>3時對多糖得率影響不大,可能在強酸環境下,多糖被降解,并且水提法成本低,所以酸提山茱萸多糖意義不大。

2.2正交實驗

根據以上的單因素實驗分析,確定L9(34)表的3個因素溫度、時間、料液比的3個水平。結果見表1。表1正交實驗的因素及水平（略）

正交實驗確定最佳提取條件。結果見表2。表2正交設計及實驗結果（略）

由表2得知,3種因素對多糖得率的影響程度為A(溫度)>B(時間)>C(加水量),水提法提取山茱萸多糖的優方案是A3B3C1。由表3方差分析和F檢驗得知,在95%可信程度下A和B對多糖得率的影響顯著,C沒有顯著性影響,三者對本實驗的影響程度與極差分析結果一致。表3正交設計實驗結果方差分析（略）

2.3山茱萸多糖的分離純化按最佳提取工藝流程,提取的山茱萸粗多糖ZA,經Sevag法脫蛋白,由多糖得率看在脫蛋白過程中造成了多糖的同步損失,損失率在8%左右,可能和含有糖蛋白有關系。脫蛋白后經丙酮-乙醚-無水乙醇溶劑系統反復沖洗后,繼續分級醇沉得到ZB和ZC,因預實驗顯示ZB抗氧化活性和免疫活性要明顯小于ZC,因此將ZC200mg過DEAE-52纖維素離子交換柱,得到3個樣品S15.2，S2118.6mg和S311.2mg(S1和S3量少未做研究)。見圖6。采用SephadexG-200對S2進一步純化,洗脫曲線見圖7。經濃縮,透析,冷凍干燥,得到進一步純化的多糖樣品S21。由圖7看出S11為單一對稱峰,說明其組分均一。

2.4山茱萸多糖理化性質分析

ZA，ZC，S2和S21見表4經元素分析儀測定多糖S21中含C%37.80%，H%5.64%，S%0.37%，N未檢出。表44種多糖理化性質（略）

3結論

山茱萸多糖經單因素實驗和L9(34)正交實驗,得出其最佳提取工藝條件是:提取溫度80℃，料液比1∶60，提取時間5h,在此條件下山茱萸多糖得率是13.8%,經用Sevag法脫蛋白、丙酮-乙醚-無水乙醇溶劑系統反復沖洗、分級醇沉、DEAE-52纖維素離子交換柱層析法和SephadexG-200凝膠柱層析法對其進行分離純化得到組分S21,經元素分析儀測定C%37.80%，H%5.64%，S%0.37%，N未檢出。本實驗對山茱萸多糖提取工藝,理化性質等進行了初步研究,為以后深入研究奠定了基礎。

【參考文獻】

［1］潘揚,王天山.植物山茱萸化學成分的研究概況［J］.南京中醫藥大學學報，1998,14(1)：61.

［2］魏淑梅,崔玉海.山茱萸多糖的分離純化及活性研究［J］.黑龍江中醫藥,2006,19(4)：249.

［3］李平，王艷輝，馬潤宇.山茱萸多糖PFCAⅢ抗氧化性能研究［J］.北京化工大學學報，2003,30(3)：35.

［4］張維杰.復合多糖生化研究技術［M］.上海:上海科學技術出版社，1987：296.

［5］齊慧玲，魏紹云，王繼倫，等.Sevag法去除白及多糖中蛋白的研究［J］.天津化工，2000,3：20.

［6］李建武,余瑞元，陳麗蓉，等.生物化學實驗原理和方法［M］.北京：北京大學出版社，1994：125.

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關鍵詞：茶多酚，溶劑提取，沉淀法，超臨界流體微波萃取

 

0.引言

茶多酚是一類存在于茶葉中的多羥基酚性化合物的混合物, 具有良好的抗氧化性能, 其抗氧化性能比維生素E的抗氧化效價高10 ～20 倍,而且無毒, 因此是一種理想的食品天然抗氧化劑。

茶多酚（Tea Polyphenols）是茶葉中多酚類物質的總稱，包括黃烷醇類、花色苷類、黃酮類、黃酮醇類和酚酸類等。其中以黃烷醇類物質（兒茶素）最為重要。茶多酚又稱茶鞣或茶單寧，是形成茶葉色香味的主要成份之一，也是茶葉中有保健功能的主要成份之一。本草千葉IT茶中含有豐富的茶多酚 (學名Camelliasinensis)。日本千葉大學山下泰德教授等科學家研究表明，茶多酚等活性物質具解毒和抗輻射作用，能有效地阻止放射性物質侵入骨髓，并可使鍶90和鈷60迅速排出體外，被健康及醫學界譽為“輻射克星”。

1.茶多酚提取方法

目前國內外茶多酚粗品的提取的方法主要有:溶劑提取法、離子沉淀法、樹脂吸附分離法、超臨界流體萃取法、超聲波浸提方法、微波浸提法等6種方法. 此外,還有低溫純化酶提取法,和鹽吸法等。

1.1有機溶劑萃取法

這是目前國內使用最廣泛的方法之一。其原理是利用茶葉中不同化合物在不同溶劑中的溶解度差異進行提取分離。該法比較簡單,對茶多酚的提取率為10 %～15 %。但是有機溶劑用量多,溶劑回收設備及所消耗的能量比較大。

溶劑提取法的優點是穩定、可靠;缺點是:用水提取,茶多酚提取率低(一般提取率為5%～6%) ,產品純度低,產品易氧化,且其中含有大量雜質(如植物多糖、茶棕色素、色素、咖啡堿、樹脂等) .而用有機溶劑提取,提取率雖可有所提高(可達到10% ～15%) ,但由于浸提液中不但含有茶多酚,而且還含有茶色素、咖啡堿等雜質,要得到精品,還須反復除雜精制,工序多,工藝繁瑣復雜,萃取工序一般需經3 級錯流萃取;需多次蒸餾,加熱時間長;需要用大量的有機溶劑,有的有機溶劑回收困難,有毒、易燃,不利于安全生產。

1.2離子沉淀提取法

該方法主要是利用有些金屬離子能夠沉淀茶多酚而使其與咖啡堿分離。該法的特點是減少了有機溶液的用量,所得產品茶多酚含量較高,可達95%以上,但是工藝操作比較嚴格,廢渣、廢液處理量較大。

沉淀法的優點是: ①減少了有機溶劑的使用量,從而大大減少了環境污染,生產安全性好; ②工藝比較簡單:茶葉經浸泡后,加入沉淀劑即可得到茶多酚與金屬結晶性沉淀物,不必濃縮提液,可在一定程度上降低能耗,成本低; ③選擇性強,因而產品的純度較好, 可達95%以上, 有的高達99.5 %; ④產品色澤好,水溶性好. 缺點是: ①無機鹽沉淀劑沉淀轉溶時p H 值波動大,而茶多酚在堿性條件下易氧化,影響產品品質; ②過濾和稀酸轉溶過程中茶多酚的損失較大; ③溶液中咖啡堿等干擾物質因與茶多酚配合物的吸附產生共沉淀作用而被帶入沉淀中,影響茶多酚的純度. 此外,有些金屬鹽殘留對產品安全性也構成隱患; ④工藝操作控制比較嚴格,廢渣、廢液處理量大。

1.3吸附分離法

此法是將綠茶葉(或茶葉末) 加熱水浸提3 次,合并提取液。茶葉提取液通過高分子吸附劑進行吸附,然后用90 %乙醇溶液洗脫,使吸附劑吸附的茶多酚脫附于乙醇中,經減壓蒸餾回收乙醇。濃縮液經真空干燥或噴霧干燥得到茶多酚。該法工藝、技術簡單,能量低,但需要對茶多酚選擇性強的高吸附量的吸附劑。免費論文參考網。

1.4超臨界流體萃取法

與一般的萃取分離技術相比, 超臨界流體萃取技術具有優良的傳遞性能, 較強的滲透力, 良好的選擇性, 對有機物溶解度大, 萃取率高, 產品質量好, 操作條件溫和, 特別適用于分離熱敏性物質等優點。國內外已有專利用超臨界氣體脫除咖啡堿的方法提取茶多酚。其工藝要點為: 茶葉末經SFE萃取→茶多酚粗品→純化→高純度茶多酚。

就目前已報道的研究成果看, 用超臨界二氧化碳萃取法提取茶多酚仍然有一定的技術障礙。主要表現在提取率較低, 可能與茶多酚在臨界二氧化碳中的溶解度有關。

1.5超聲波浸提法

超聲提取法是對提取過程進行超聲波強化處理,是利用超聲波的機械破碎和空化作用,加速茶多酚浸提物從茶葉中向溶劑擴散的速度,縮短浸提時間,增加有效成分的提取率. 再用傳統工藝相同的過程從提取液得到茶多酚,然后純化. 超聲波提取茶多酚具有工藝簡單,提取溫度低、回收率高、氧化損耗小,節時、節能、提取率高等優點,同時避免了有毒溶劑的使用,具有良好的工業推廣價值。

1.6微波浸提法

微波輔助萃取技術，是指使用適合的溶劑在微波反應器中從天然藥用植物、礦物、動物組織中提取各種化學成分的技術和方法. 基本原理是利用在微波場中分子發生高頻的運動,擴散速率增大,因此茶多酚等浸提物在微波的輻射作用下可快速浸取出來. 影響微波提取過程的主要因素包括:微波加熱功率;提取溶劑的種類,萃取時間;溶劑用量以及潤濕水量等. 微波輔助萃取技術比目前常規使用的工藝有以下特點:1.處理時間快,微波方法僅用數分鐘乃至數十秒即可,具有高效節能的作用; 2.提取率高,節約了溶劑,大大提高了提取效率;3.避免使用有毒溶劑、產品安全; 4.熱效率高,控制容易,便于自動化和提高生產率。

2.茶多酚的主要用途

茶多酚具有很強的抗氧化作用，其抗氧化能力是人工合成抗氧化劑BHT、BHA的4-6倍，是VE的6-7 倍，VC的5-10倍，且用量少：0.01-0.03％即可起作用，而無合成物的潛在毒副作用；而茶素對食品中的色素和維生素類有保護作用，使食品在較長時間內保持原有色澤與營養水平，能有效防止食品、食用油類的腐敗，并能消除異味。

在醫藥方面，具有清除活性氧自由基，阻斷脂質過氧化過程，提高人體內酶的活性，從而起到抗突變、抗癌癥的功效；茶多酚對血清膽固醇的效應主要表現為通過升高高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）的含量來清除動脈血管壁上膽固醇的蓄積，同時抑制細胞對低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）的攝取，從而實現降低血脂，預防和緩解動脈粥樣硬化目的。免費論文參考網。并且能夠降血壓、降血糖、防止腦中風、抗血栓、提高人體綜合免疫力等功效。免費論文參考網。

3.結語：

近年來, 茶多酚提取分離技術得到了不斷的完善和發展, 產品亦呈多樣化, 即每個工藝都能對茶多酚進行不同程度的分離純化, 進而獲得純度不一的茶多酚系列產品, 以滿足市場需求。但在實際生產中往往容易忽略一些工藝條件對茶多酚生物學活性的影響, 如提取溫度、pH值對產品成分組成、含量以及穩定性等方面的影響。

茶多酚是從茶葉中提取出的天然活性物質,具有很強的生物學活性,除了具有良好的保鮮、抗氧化性, 清除自由基和抑制致癌物引起的突變,還可抑制細胞增殖、誘導細胞凋亡和阻滯細胞周期等, 是一種較有前途的抗癌藥物。

參考文獻：

[1]黃麗鳳,劉友平,黎代余. 茶多酚提取純化工藝研究進展.中國食品添加劑.

[2]王小梅，黃少烈，李俊華. 茶多酚的提取工藝研究.廣州化工.2001-4

[3]王玉春. 茶多酚的提取方法及應用研究進展. 甘肅聯合大學學報(自然科學版).2008-5

[4]熊何建,胡慰望,謝筆鈞. 茶多酚分離制備的新工藝[J]. 食品工業科技,1997 (6) :32234.

[5]尹蓮. 茶多酚制備工藝的改進研究[J] . 食品科技,1998 (6) :33234.

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【關鍵詞】中藥化學 教學改革 應用型人才

【中圖分類號】G643 【文獻標識碼】A 【文章編號】1009-9646(2008)09(b)-0019-01

中藥化學是中藥學專業的核心課程。隨著中藥現代化進程的推進,要求對于傳統中藥的藥效物質基礎更加明確,人們更加重視對于中藥“成分”尤其的“活性成分”的科學闡述。這就對中藥化學的教學策略提出更高的要求,即要求中藥化學的本科教學應以中藥“活性成分”為中心,以解決科研、生產中實際問題為內容,以培養思路清晰、實驗技能扎實的應用型人才為主要目標。因而,筆者認為應結合教學當前的實際情況在中藥化學的教學策略應作出了一些相應的調整。

1 以“活性成分”為中心,充分調動學習熱情和興趣

在中藥化學教學過程中,化學成分是教學的基礎部分,以往的教學過程中往往以各類化學成分的特征來引入各章內容,如在黃酮類化合物一章中,往往是直接以“具有2-苯基色原酮”的結構特征為切入點。雖然,直接提出結構的重要特征可加深對其印象,可這樣容易使學生只機械地把結構進行記憶,即是平面化的、化學式的教學模式。試著變換一下引入的策略,如果先把大家所熟知的藥物維腦路通作為引入點,很容易引起學生對于這一治療急性腦血栓藥物的關注,進而引入其結構為羥乙基蘆丁,即為中藥槐米中蘆丁的結構改造物。學生在急于探究活性物質結構的同時,自然引出黃酮類化合物的結構特征。雖然僅是教學引入方法的細節改進,卻極大的激發了學生的學習熱情,對于這類成分的結構會產生濃厚的學習興趣。除此之外,對于成分的認識上也不再停留于結構的單純認識上,而是更有利于形成“成分”和“活性”相聯系的立體知識結構。

2 以解決科研、生產的實際問題為內容

教學內容應緊密與生產科研實踐相結合,這是對于應用型人才培養的必然要求,尤其對于中藥化學這一應用性較強的學科。在教學環節上,可以首先提出本學科生產實踐中的一些具體問題,采用設問式的教學方法,在引導學生解決問題的同時,培養學生利用課程的知識解決實際問題的思路和方法。例如:在總論中介紹“系統溶劑提取方法”時,可首先面向學生提出這樣的問題:“如果將來你在企業工作過程中,上級主管提出對于一味臨床作用明確但活性部位和成分均未知的傳統中藥,怎樣開發成現代的中藥新藥的課題。你該如何進行？采用怎樣的科研思路和方法？”就業和未來工作發展都是學生其最為關心的,上述的設問也是實際工作中經常碰到的,學生的注意力和思維力此時都會全部集中,就下來介紹的系統溶劑提取法與藥物活性篩選相結合方面的知識,自然會水到渠成,不但印象深刻而且可以能很快應用的實際工作中,也拓寬了學生的視野和思路。

3 以培養思路清晰、實驗技能扎實的應用型人才為主要目標

應用型人才要求有完整清晰的思路和扎實的實驗技能,即較強分析、解決實際問題的能力。在思路培養方面,應主要貫穿于提取分離工藝的教學內容中。在各章講授相應部分時,教學目標和重點不應局限于對某種藥材或某種成分的機械記憶上,關鍵是掌握此類成分的常用方法及其原理以及靈活運用上,今后面臨此類成分時能合理設計提取分離工藝和形成完整的思路。例如:實驗教學課中提取黃藤中巴馬丁生物堿的提取方法,為小檗堿型水溶性生物堿的較為通用的提取方法,原理是根據水溶性生物堿可溶于乙醇的性質來提取,并且根據小檗堿型生物堿鹽酸鹽水溶性較差沉淀析出來精制。關鍵是提示學生以后碰到此類生物堿時可采用類似的方法來解決。再如,按類別分離生物堿利用了生物堿的堿性及某些兩性生物堿的酸性官能團,應強調這是生物堿類成分的系統分離,并結合藥效活性篩選出有效部位或有效成分。然后有效部位和成分的理化性質,在實際生產中進行有目的性的分離。把系統分離―活性分離―目標分離的科研思路融入具體教學過程中。

實驗技能訓練是應用型人才培養的關鍵環節之一,化學成分提取、分離、結構鑒定是中藥化學課程的關鍵技術,并具有一定的難度。在實踐教學過程中,除加強日常教學實驗中常規提取分離技術的反復訓練之外,還專門開設了中藥化學實驗技術的系列專題講座和訓練;如現代分離精制技術的應用及進展等內容。尤其是在開放創設性實驗課題的過程中,注重了高極性成分的分離技術,是對于中藥復方水提液大量未知活性成分沒有闡明這一現狀,有針對性開展的本科教學科研實驗課題。學生以課題小組的形式加入,在課題完成過程中,學生對于先進儀器設備、分離材料(包括制備反相色譜、高速逆流液滴色譜等)的使用和操作得到具體的訓練和掌握;學生在本科階段就接觸到了應用性較強的前沿技術領域,培養了科學精神,激發了科研興趣。

4 充分利用中藥化學的基礎知識,培養各學科的綜合運用能力

中藥化學為中藥學科的專業基礎課程,其研究對象為中藥“有效成分”,是其它中藥學課程的理論基礎。在教學過程中,應充分和相關學科進行聯系和貫通,知識體系的融合是綜合應用型人才培養的一項重要要求。例如在強心苷提取教學中,常規應介紹提取強心苷根據制備速效和長效強心藥物的不同目的,利用或抑制強心苷的酶解。在這一教學環節中,可進一步聯系藥理學藥物代謝方面的知識,即抑制酶解可得到原生苷,極性較強且水溶性好,藥理學中水溶性好的藥物在體內血清中分布濃度高,而且容易代謝排除體外,這正是作為速效強心藥物的機理。這樣就把化學結構―化學性質――藥物代謝―臨床應用等方面知識統一起來,形成綜合完整的知識體系。除有利于知識的系統掌握,更有益于學生將來的新藥創新和設計。再如中藥黃芩的南北方存在不同的炮制方法,其科學的評價也歸于黃芩苷在兩種不同炮制工藝條件下從結構到活性的變化,從而選擇合理的炮制工藝,這樣就把中藥化學和炮制學知識結合起來,使學生對二門學科的的認識水平更為深入,即中藥化學為理論基礎,炮制為實踐應用,二者相輔相承。

面向應用的中藥學科專業知識人才的培養,應根據目前科學技術發展水平和現有的教學條件對教學策略作出相應的調整,并采用靈活機智的教學形式來達到最佳的教學效果。中藥化學的教學改革也更應注重細節方面,尤其是在思路、技能和知識體系的完善上,而學生的實踐應用能力則是對整個教學效果最好的評價和檢驗。

研究生培養質量的關鍵是學位論文的質量。為了切實把好研究生學位論文質量關,電氣工程學院一方面抓好論文開題環節工作;另一方面,在研究生論文開題后的第二學期,由學院研究生培養質量督察組對本院碩士研究生的論文工作進行中期抽查。其目的在于了解論文選題的實用價值或理論意義,檢查其論文工作的進展情況。論文工作的抽查對研究生和導師起到了有效的督促和檢查作用;同時能及時發現論文工作中存在的問題,針對不足,提出整改意見,對涉及的問題、內容及方法盡可能的給予具體的指導和幫助。

具體辦法是:由于目前碩士研究生規模較大,碩士生全部參加由督察組組織的中期檢查是不切實際的,因此督察組從每位碩士導師所指導的研究生中隨機抽查一名學生進行論文工作中期檢查。未抽查到的學生,由導師自己組織學生的中期檢查。如在2001級碩士研究生中,督察組抽查了30名學生,按專業分成3個組,要求學生本人簡要介紹論文選題意義、理論根據、實用價值、資料收集情況、論文工作總體安排和進度,開題以來研究的進展、取得的效果,存在的困難和問題、論文采用的技術方法、進一步完成論文的計劃等內容。

通過對抽查的結果分析,學院大多數研究生的學位論文選題、難易程度符合碩士研究生學位論文的質量要求,有些研究生在導師指導下,還積極參與導師科研課題研究工作,能做到理論聯系實際,在科研實踐中培養科研實戰能力。抽查中也發現少數研究生在論文工作中存在不同性質、不同程度的問題,比如:有的論文工作進展緩慢、有的沒有明確的進度計劃、有的難度太大需要調整等。

通過督察組對碩士論文的中期抽查,對研究生的培養質量的提高起到了積極作用。其作用表現在:

(1)對論文進度的督促作用:由于論文是隨機抽查,這不僅給學生、同時也給導師一種督促,促使學生和導師重視研究生的論文工作,注意掌握論文進度;

(2)對論文題目、內容、進度的了解:論文的中期抽查,有利于導師和督察組及時掌握研究生的研究內容和進度情況;

(3)發現問題、解決問題:由于參加的督察組專家都是比較有經驗的老師,通過檢查,督察組專家及導師能及時發現問題,提出具體的問題所在并提出一定的指導建議,以并幫助學生解決問題;

(4)學術交流的作用:由于不同的研究課題在一起檢查,對學生、對老師都起到了學術交流的作用。

我院連續4年的論文中期抽查實踐取得了明顯成效,促進了研究生培養質量的提高。

3.2 嚴格博士論文的預審制度,確保博士論文質量

博士論文預審制度,對保證博士論文質量有十分重要的作用:

(1)博士論文的預審,是博士論文答辯前最有效的質量檢查。博士論文中期檢查時,論文研究還不夠深入、全面、系統,還有大量研究工作要做,因此,難于對論文質量進行全面檢查。但提交預審的論文,基本上已完成了全部論文工作,通過預審,可以檢查論文是否達到了預期要求,研究深度是否足夠、是否有創新;

(2)博士論文的預審,也是論文質量檢查和論文完善的最佳時刻。對預審中發現的問題,學生還有時間、有機會對論文中的問題進行修改、完善;

(3)由于論文預審是對學生負責、對導師負責,因此預審專家沒有什么壓力,可以憑借專家們的豐富經驗和學術造詣,本著認真、負責的態度,對論文提出中肯的意見和建議,這對論文的完善和質量的提高有重要意義。

但真正要達到博士論文預審的目的,預審專家是關鍵。如何確定預審專家,目前還沒有一個明確的制度來保證,但有一個基本的標準,就是:一是要熟悉論文研究內容,且具有較高學術水平,研究領域要比較寬;二是要工作認真負責;三是要公平、公開、公正,能客觀地提出自己的評審意見和建議。為保證預審專家的客觀性和學術水平,學院規定預審專家組中必須有一位除導師外的院督察組專家。

3.3 堅持督察組聽課制度,提高教學質量、優化課程設置

學院長期堅持安排院督察組聽課的作法。跟一般性的聽課不一樣,學院的這種聽課不僅是對上課紀律、教師的表達能力、教學手段以及教學效果等的簡單檢查,而是更加深入,也是一種對課程內容和課程設置的調研和檢查。在安排專家聽課時,學院特別注意安排熟悉該課程內容的專家聽課,以了解該課程內容和課程深度以及與該課程相關的其它課程的內容銜接。聽課后,除及時與任課教師交換意見外,還對相關課程的設置、內容的整合等提出意見和建議。

4年來,電氣學院已建立健全了院系研究生培養質量督察組制度,每個學期院督察組都定期或不定期召開督察組會議,傳達學校研究生教學的有關精神以及介紹其它院系好的管理經驗,并嚴格督促、檢查本學院研究生的開題、中期檢查、論文預審、論文答辯以及研究生課程上課質量等,對研究生課程設置、培養計劃等方面的工作效果顯著。在實踐中,也注意處理好學院督察組與學院學位分委會以及行政的關系,做到各司其職、互相支持、配合促進。

實踐表明,充分發揮院系研究生培養質量督察組的作用,對確保研究生培養質量具有重要意義。

參考文獻

[1] 李八方,周珊珊,曹揚.研究生教育質量保證體系的構成、特征和控制.學位與研究生教育,2004(6):20～24.

[2] 肖敏.研究生教育三維質量保證體系.學位與研究生教育,2003(6):34～37.

[3] 程永波,廖曉玲.論研究生教育質量觀與發展目標模式.學位與研究生教育,2003(8): 16～20.

[4] 任增林等.美國高等教育質量保證體系的特點及其對具有中國特色質量保證體系建設的啟示.學位與研究生教育,2004(3): 21～30.

篇(5)

關鍵詞：教學方法 教改 發酵工藝

前言

發酵工藝學是建立在牢固掌握生物化學、微生物學、食品工程原理等專業基礎課的理論知識和專業技能基礎上的課程，它還涉及發酵設備、發酵工廠設計、發酵分析等內容。主要講授發酵工業上微生物菌種的培養基保藏，發酵工業培養基及原料處理，發酵條件的影響及控制，發酵產物的提取及精制，工業微生物的生長、物質代謝，產物的生物合成及微生物的代謝調控機制以及發酵工程中的先進技術在食品行業中的應用。通過本門課程的學習，要求學生掌握發酵工業微生物菌種的分離純化、保藏與復壯方法，掌握發酵工業培養基的主要原料及處理方法，了解微生物發酵工藝及設備，了解影響發酵的因素，并掌握相應的控制方法，掌握發酵產物的提取與精制方法，掌握工業微生物生物合成的機制，了解其物質代謝及發酵機制，掌握代謝的調控機制以及發酵工程中的先進技術的原理和在食品行業中的應用。

一、教學方法與改革方案

作者多年致力于發酵工藝學課程的教學和科研工作，積累了相對于該課程的相關教學方法和經驗，發表了工業發酵方面的多篇科研性文章，經過多年的教學實踐和探索，進行了發酵工藝學這門課程的教學方法與改革方案研究工作，具體介紹如下。

1. 教材選擇及學習方式改善

現用教材為“面向二十一世紀教材”――《食品發酵與釀造工藝學》，該書將總論與工藝結合得比較連貫，發酵和釀造也有精當的比較，適于該課程使用。教材是教師教和學生學的重要資源。對學習素材感興趣，產生主動學習的愿望，是學生主動探索、合作交流的重要前提。

在傳統的教學模式下，學生圍著書本與教師轉，由教師牢牢地控制著。現在，要尊重學生的主動精神，培養學生自主探究的意識和能力。在教學活動中，許多學生已經適應被動式的接受知識，回答問題機械化、模式化，遇到需要綜合運用所學知識分析解答的問題，許多學生寧可等待教師公布“標準答案”，能夠主動質疑的學生更是少得可憐……學生被動的學習方式，必然導致其學習能力的退化。改善學習方式就是要改變這種被動的學習狀態，充分發揮學生的主動性和獨立性。改善學習方式，是尊重每一個學生的需要，是提升學生學習品質的需要。

新時期的教育越來越重視學生學習方式的改善，要求教師對教材中不同教學內容的特點、難易程度與學生的認知基礎、情感體驗都能通盤考慮。這樣，才能利于學生的發展。實踐證明，教師應積極轉變教育觀念，創造性地使用教材，這樣，才能使生動的教材變成生動的課堂，有效地改善學生的學習方式。所以，要從根本上改變學生原有的、單一被動的學習方式，促進和幫助學生形成旨在充分調動、發揮自身主體性的學習方式，使學生在教師的指導下主動而富有個性地學習。

2. 增設與該課程相配套的實驗課

實驗在自編教材基礎上，增開了菌種保藏（3種）及學生感興趣的納豆發酵（細菌型）、丹貝發酵（霉菌型）、啤酒發酵(酵母)以及大型綜合發酵實驗―檸檬酸發酵等內容。在實驗內容的安排和設計中，為避開與基礎課驗證性實驗可能產生的重復，同時為避免學生實驗陷入簡單作坊工藝操作，實驗安排以原料產品為主線，將微生物原理、工藝調控、產品分析、相關的測試和計算融入整個實驗中，確保學生通過一個產品的發酵工藝技術掌握較為通用的實驗設計和操作技能以及分析問題和解決問題的能力，并鼓勵學生進行相關科研論文的撰寫和嘗試性發表，為迅速發展的食品生物技術領域和發酵食品行業輸送基礎理論扎實、實踐能力強、研發潛力大的專業人才。

3. 參觀實習基地建設

學生課內參觀實習的發酵工廠不得少于3家，每個點均設1~2名帶隊指導老師（由公司技術及質量主管擔任）向學生介紹工藝流程及調控技術等，這一環節大大增強了這門課程的直觀性，并給予了學生接觸企業、了解企業需求、尋求行業生長點的機會。

4. 教學方法與手段改革

制作大量的彩色投影膠片，并復印裝訂成冊，存放于資料室，便于學生翻閱；利用多媒體教學手段增加部分發酵工廠、工藝布局等內容及一些演示性實驗，給予學生更直觀的印象。為進一步加強實踐環節，購入釀造工藝學等專業錄像供學生觀看。涉及到產品生產工藝調控的專題環節，還聘請了發酵企業的車間主任或技術主管作專題介紹。

5. 教與學的效果評價

主要考核方式為筆試，期中考試結合課程論文對學生的學習方法及總論部分的掌握程度進行考察，從論文中發現學生的學習個性和特長。并鼓勵學生將所撰寫的課程論文（主要是綜述）嘗試性地進行投稿，以促進學生對所學知識領域的了解和探索。

6. 注意收集畢業生、企業的反饋意見

該門課程教學的目標即是直接應用于生產實踐，因此畢業生及企業的反饋意見將有助于及時彌補教學中疏漏的重點，以利學生學以致用。與在發酵企業工作的往屆畢業生保持密切聯系，關注企業需求的新動向，及時進行相關知識點的強化。經常走訪用人單位，了解單位對畢業生的相關評價，更加了解我們所培養學生的長處和不足，從而在以后的教學過程中要進行揚長避短式的教學，以長促短，彌補不足之處，培養出更適合用人單位需求的學生。

7. 科研反哺教學

教研人員要致力于發酵食品相關領域的科研工作，積累豐富的科研經驗，然后豐滿教學內容，賦予課堂講授過程的生動性、真實性、趣味性和技巧性，讓學生學到許多書本以外的經驗和技巧。

二、教學效果

按照上述介紹的教學方法和教改方案進行發酵工藝學課程的教學開展，取得了較為顯著的效果，主要體現在以下幾個方面：

1. 充分利用前期課程食品微生物學及發酵工程概論等的知識結構，使學生獲得了連貫的發酵與釀造的系統知識，學生自學能力明顯提高。

2． 利用多媒體教學手段增加了部分內容及進行一些演示性實驗，增強了教學內容的動感和趣味性，豐富了學生的想象空間。

3． 學生畢業設計樂于選擇微生物發酵方向的課題，并在完成過程中表現了較高的專業技能。

由于該課程為專業課，其后續內容基本體現在畢業論文的完成過程中，課程教學的成功點在于：大批學生自選進入發酵類實驗室完成論文；論文設計思路較新；能較準確地解釋實驗中發現的現象，解決實驗中遇到的障礙；在工藝性論文中能考慮生產實際需要，如成本、規模化的可行性、整體效益、環保等；論文寫作用語精確，書寫規范。論文指導老師也反映學生整體發酵方面的專業素質較高。

4． 學生善于提問，研討愿望強烈，有創新意識。

5． 建立了合理的教學效果評估方式。

以課程論文的形式于期中進行教學效果考察，并在課程論文完成過程中引導學生把握學科前沿及重點，挖掘生長點。

小結

食品發酵技術的迅猛發展將要求高等院校輸送一批具備食品基礎理論、精于發酵技術的高能力、高素質專門人才，因此，目前的教學體系仍要進一步完善，以便進一步激發學生學習興趣和創新激情。

由于行業間技術保密，給實踐教學帶來了一定難度，進入工廠進行的實踐環節時間越來越短，內容越來越少。為保證這一環節，要以多種形式與更多的企業聯系。

另外，要注重實驗教學的設計和投入。實驗教學在該課程的學習中應該占有很重的份量。加強發酵工藝學課程實驗教學，不但能激發學生學習該門課程的興趣，培養學生觀察、實驗操作思維能力，并且能加深學生對知識的理解，大面積提高發酵工藝學課程教學水平。因此，在教學中積極創設實驗環境，想方設法多做實驗。除了教材應做的實驗外，還要根據教學內容合理的增設一些觸手可及的就地取材的實驗。

傳統教學過程中，主要靠教師的講解和演示實驗，由于實驗器材的限制，學生大多只能被動地聽、被動地看，老師成了課堂教學的主體。應該加大實驗儀器設備的投入，很多實驗內容可由學生隨堂動手做，變被動聽為主動學，這樣教學中的主體由教師轉向學生，在學生的學習生活中，教師首先是一個平等的參與者，其次才是一個引導者，為學生提供探索的平臺，引導學生把探索學習進行到底。

參考文獻：

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關鍵詞 提取方法 香菇多糖 苯酚硫酸法 提取率

中圖分類號：Q539 文獻標識碼：A DOI：10.16400/ki.kjdkz.2015.06.029

The Study of Extration Effect on Lentinan by

Different Extration Methods

ZHANG Rui， ZENG Wanyong， GUO Huanzhong， LI Jinhua

（School of Biology and Pharmaceutical Engineering， Wuhan Polytechnic University， Wuhan， Hubei 430023）

Abstract Different extraction methods for leninan contents were compared. The results show that the raw extration rate reaches 24% by 0.4mol/l of hydrochloric acid， while it is 15.58% by 0.8mol/l of NaOH. Both of the methods are far better than hot water extration method， which is 7.56% in the study. The activity of the extrations should be investigated futhermore.

Key words extraction method; Lentinan; PhenolSulphate colorimetry; rate of extraction

香菇（Lentinus edodes）是一種集營養、保健和藥用功效于一體的可直接利用的藥食兩用菌類，廣泛地分布于我國各省區，在我國有悠久的食用歷史。香菇中含多種活性成分，其中香菇多糖具有抗病毒、抗腫瘤、降血糖等生物活性，是非特異免疫刺激劑，并且在臨床上得到廣泛應用。①

大量工作證明香菇多糖能增強腹腔巨噬細胞的吞噬能力，提高機體抗腫瘤功能且無毒副作用，是理想的免疫促進劑。香菇多糖的抗腫瘤活性與分子量有關，而且其硫酸酯化合物具有抑制愛滋病毒的作用。②林桂蘭等對香菇多糖抗食用油脂的氧化作用、清除羥基自由基的作用、清除超氧陰離子自由基的作用以及在模擬胃液條件下清除的作用進行了研究，結果表明，香菇多糖提取物具有體外抗氧化性能（林桂蘭等，2006）。

香菇多糖的提取方法一直是研究的熱點。前人采用了高壓熱水浸提法、③超聲波分步酶解法④等提取香菇多糖。本實驗以神農架產香菇為材料，比較了不同提取方法對香菇多糖得率的影響。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

實驗材料 干香菇購自神農架。

蛋白酶K為Merck公司產品;無水酒精，濃鹽酸，氫氧化鈉，苯酚，濃硫酸，正丁醇，氯仿，30%雙氧水，磷酸二氫鈉，磷酸氫二鈉，氯化鈉，鐵氰化鉀，三氯乙酸，六水氯化鐵，三羥甲基氨基甲烷，鄰苯三酚，七水硫酸亞鐵，水楊酸等，以上試劑均為分析純。

1.2 香菇多糖的提取

1.2.1 香菇粉的制備

將干香菇在烘箱內80℃烘干至恒重，粉碎機磨碎成粉，過60目篩，備用。

1.2.2 香菇多糖提取

（1）熱水浸提法：⑤取香菇粉10g于錐形瓶，加入200ml蒸餾水，在80℃恒溫水浴上回流浸提2h。用濾布過濾，分離濾液和殘渣（濾渣在水中反復浸取2次，最后合并濾液）;合并濾液，以3000r/min離心20min。取部分上清液，稀釋60倍，用苯酚硫酸法測多糖濃度。⑥

（2）酸浸提法：分別取香菇粉10g于5個錐形瓶中，水浴加熱溫度為80℃，冷凝回流，料液比1：20，按照鹽酸濃度0.1、0.2、0.3、0.4、0.5mol/L加熱2h。后續步驟同（1）。

（3）堿浸提法：分別取香菇粉10g于5個錐形瓶中，水浴加熱溫度為80℃，冷凝回流，料液比1：20，按照氫氧化鈉溶液濃度0.4、0.6、0.8、1.0、1.2mol/L加熱2h。后續步驟同（1）。

1.2.3 香菇多糖的分離、純化

取香菇粉10g于錐形瓶，加入200ml蒸餾水，在80℃恒溫水浴上回流浸提2h。用濾布過濾，分離濾液和殘渣（濾渣在水中反復浸取2次，最后合并濾液）;合并濾液，以3000r/min離心20min。收集全部上清液，經蛋白酶k處理、Sevag法去蛋白、雙氧水漂白、⑦醇沉、復溶，苯酚硫酸法測香菇多糖含量。

1.3 葡萄糖標準曲線繪制

稱取無水葡萄糖14.8mg，加水溶解，定容至100mL。分別取0ml、0.4ml、0.6ml、0.8ml、1.0ml、1.2ml、1.4ml，加水至2.0ml，再加lml 5%苯酚溶液，迅速加入濃硫酸5ml，搖勻，靜置20min，在490nm波長處測定吸光值，繪制標準曲線。⑧

2 結果與分析

2.1 不同提取方法獲得多糖溶液顏色

實驗發現，不同提取方法得到的溶液顏色存在很大差別，總體來說，浸提后原液顏色較深，醇沉后溶液顏色變淺。堿法提取的溶液顏色較酸提和水提法獲得的溶液顏色深，而酸提和水提的顏色較淺（見表1）。

表1 不同提取方法得到的多糖溶液外觀

2.2 苯酚硫酸法測定總糖標準曲線

根據1.3的方法獲得的結果繪制葡萄糖標準曲線，得到標準曲線如下（見圖1）。該標準曲線回歸方程為： = 0.0067+0.0879，R2= 0.9967 ，線性范圍：0～150 g。

圖1 苯酚硫酸法測定總糖含量標準曲線

2.3 不同提取方法對香菇多糖提取率的影響

比較了不同提取方法獲得溶液的吸光值，發現鹽酸濃度及NaOH濃度對提取率都有很大影響。鹽酸濃度在0～0.4mol/l區間隨濃度升高提取率升高，但進一步提高酸濃度則提取率下降。NaOH濃度則在0～0.8mol/l區間與提取率呈正相關，堿濃度進一步提高則提取率下降。

比較酸堿提取法的最適濃度發現，鹽酸浸提時，0.4mol/l HCl提取率最高，吸光值為0.8246，折算提取率為24.0%（見圖1）;NaOH浸提時，0.8 mol/l NaOH提取率最高，吸光值為0.5940，折算提取率為15.5%（見圖2）;而熱水法提取的吸光值為0.3104，折算提取率為7.56%。因此，從提取率來看，酸浸提法>堿浸提法>水浸提法，酸浸提時，鹽酸最適濃度為0.4mol/l，堿提時，NaOH最適濃度為0.8mol/l。

圖2 酸浸提法及熱水浸提法提取液吸光值

圖3 堿浸提法及熱水浸提法提取液吸光值

3 結論與討論

近年來，香菇多糖因具有增強免疫能力，抗癌等活性受到消費者的青睞，已經有很多研究者對其提取工藝進行過研究，提取率也各有不同。王廣慧等（2014）超聲波協同高壓熱水浸提法，提取率為7.83%。本文采用普通熱水浸提法得率為7.56%，與前人報道結果基本一致。

本文研究結果表明，不同提取方法對香菇多糖提取率影響較大，酸提法和堿提法的提取率都大大高于熱水浸提法，這可能是因為酸堿溶解了大量的單糖及其他物質有關;相同的提取方法，提取液溶劑的濃度對香菇多糖提取率及抗氧化活性有一定影響。在提取率為主要考慮因素時，酸浸提法有較大優勢;在綜合考慮提取率和提取的香菇多糖的抗氧化活性時（另文敘述），堿浸提法較好。而酸提法和堿提法獲得的香菇多糖的其它活性有待進一步研究。

不同地區香菇多糖含量存在很大差異。本實驗采用神農架產香菇，采用水提法獲得多糖提取率為7.56%，同已有文獻報道相比，初步認為其多糖含量較高，不同產地香菇多糖含量比較仍需進一步研究證實。

*通訊作者：李金華

武漢輕工大學大學生科研項目

注釋

① 郝強.酸提香菇多糖的提取分離、結構鑒定及抗氧化活性研究.華中農業大學碩士學位論文，2008.

② 張俐納，張平義等.香菇多糖的成分及其分子量研究[J].高等學校化學學報，1998.19（9）：1513-1517.

③ 王廣慧，于德涵.高壓熱水浸提法提取香菇多糖工藝優化[J].江蘇農業科學，2014.42（6）：272-272.

④ 金小花，司文會，張野等.超聲波―分步酶解法提取香菇多糖的研究.安徽農業科學，2014.42（25）：8756，8759.

⑤ 徐懷德.天然產物提取工藝學[M].中國輕工業出版社，2013.2.

⑥ 田光輝.香菇多糖提取工藝的優化[J].延安大學學報，2002.21（2）：46-48.

篇(7)

【摘要】 目的 篩選和優化益壽地仙顆粒的最佳處方和制備工藝。方法 藥材提取物經冷凍干燥后，采用濕法二次制粒制備益壽地仙顆粒，以顆粒得率、休止角、吸濕性、溶化性為指標考察填充劑、黏合劑、抗粘劑等輔料對顆粒制備及成型性的影響，優化處方及工藝。結果 藥材提取物預凍至-50℃以下2h，轉入預凍30min的冷凍干燥機將濃縮液冷凍干燥24h，以20%蔗糖、10%乳糖、22%微晶纖維素、1%硬脂酸鎂及適量60%乙醇溶液制粒。結論 通過處方篩選及工藝的優化，制得粒度較均一、顆粒成型性好、工藝簡單方便服用的顆粒。

【關鍵詞】 益壽地仙顆粒 ；處方篩選；工藝優化

益壽地仙丸出自宋《太平圣惠方》，原名為"草還丹"，《丹溪心法》亦錄有此方，可用于腎精不足之證，癥見腰膝酸軟，頭暈目眩，健忘、失眠等，其歷史悠久、療效肯定。傳統蜜丸具有服用劑量大，攜帶不便，口感差，質量標準水平低，產品質量不能有效控制等缺點。本文在原方基礎上，運用現代科技手段對益壽地仙丸進行二次開發研究，制成便于服用、顯效快、質量可控的顆粒劑，為傳統制劑開發提供參考。

1 實驗材料

1.1 儀器

YP202N單沖壓片機（上海中南醫藥機械有限公司）、202-2型恒溫干燥箱（上海市實驗儀器總廠司）、FW135型中藥材粉碎機（天津泰斯特儀器有限公司）、210電子分析天平（日本島津）、DW-86L286超低溫保存箱(海爾)，FD-1C型冷凍干燥機（北京）。

1.2 試藥

羥丙基甲基纖維素（HPMC 皖藥準字F0701012，湖州展望藥業有限公司)、微晶纖維素(MCC 皖藥準字F0601004，安徽山河藥用輔料有限公司）、硬脂酸鎂（皖藥準字F050418，安徽山河藥用輔料有限公司）乳糖（皖藥準字F050812，安徽山河藥用輔料有限公司）等。

2 方法與結果

2.1 提取工藝及濃縮干燥工藝

2.1.1 肉蓯蓉用黃酒炮制，然后焙干；巴戟天去心；去萼，粉碎，過20目篩。

2.1.2 提取方法

肉蓯蓉60%乙醇提取，液料比1/10，浸泡30min，回流提取2h，提取兩次；枸杞水提取，液料比1/12，浸泡30min，回流提取1.5h，提取3次；巴戟天：先用75%乙醇滲漉提取，液料比1/12，pH為3，再用水提取，液料比1/12，回流提取1.5h，提取2次。60%乙醇提取，液料比1/5，pH為5，回流提取1.5h，提取2次。以上提取物使用旋轉蒸發儀在溫度低于70℃下回收溶劑，將提取液濃縮。

2.1.3 干燥方法

將上步中得到的濃縮液在超低溫冰箱預凍至-50℃以下3h，轉入提前預凍30min的冷凍干燥機將濃縮液冷凍干燥24h。

2.2 測定方法

2.2.1 顆粒得率的計算［1］

將制得顆粒依次通過10目篩到40目篩，收集通過10目篩而不能通過40目篩的顆粒稱重，所得顆粒重占原輔料總重的百分率即為顆粒得率。

2.2.2 吸濕百分率的測定［2］

將底部放有氯化鈉飽和溶液的玻璃干燥器放入25℃恒溫培養箱24h，干燥器相對濕度為75%，在一衡重的稱量瓶底部放入約20mg的顆粒，每個處方3份，準確稱量后置氯化鈉過飽和溶液的玻璃干燥器內（稱量瓶蓋打開）于25℃恒溫培養箱保存24h，定時稱量，計算吸濕百分率。

2.2.3 休止角的測定［1］

采用固定漏斗法將3只漏斗串聯并固定于水平放置的坐標紙上1cm的高度(H)處，小心將不同輔料制成的藥粉分別沿漏斗壁倒入最上一漏斗中直到最下面漏斗形成的藥粉圓錐體尖端接觸到漏斗口為止，由坐標紙測得圓錐底部半徑(R)，計算休止角α（tgα=H/R）。

2.2.4 溶化性的測定

可溶性顆粒檢查法［2］：取供試品10g，加熱水200mL，攪拌5min，可溶性顆粒應當全部溶化或輕微混濁，但不得有異物。

2.3 處方篩選

2.3.1 稀釋劑的選擇

見表1。表1 不同稀釋劑比例對顆粒制備的影響（略）

蔗糖、糊精、淀粉及乳糖是常用稀釋劑。益壽地仙顆粒提取物味苦澀、口感差，蔗糖及乳糖均有甜味，選用蔗糖及乳糖可兼做矯味劑，使顆粒劑口感更好。乳糖無吸濕性，且性質穩定，是優良的稀釋劑，但成本較高。蔗糖無臭且具有甜味，在空氣中穩定，但容易吸濕變潮，影響顆粒劑的成型性及吸濕性，但價格低廉。故兩者結合使用，可一定程度上節約成本。

綜合考慮，使用20%蔗糖雖然容易吸濕，但顆粒得率較高，顆粒成型性好，且成本較低，因此處方中蔗糖含量定為20%，乳糖含量定為10%。

2.3.2 抗黏劑的選擇

見表2。表2 不同硬脂酸鎂比例對顆粒制備的影響（略）

該處方中枸杞及肉蓯蓉均富含多糖成分，藥材提取物黏度高，藥材浸膏提取率高，顆粒中浸膏含量大，使顆粒不易成型，且流動性不好，所以選用一定量的硬脂酸鎂作為抗黏劑［11］。

綜合考慮，1%的硬脂酸鎂即可達到制備要求，且顆粒得率高，溶化性也符合2005版藥典要求，因此處方中硬脂酸鎂含量定為1%。

2.3.3 潤濕劑的選擇

見表3。表3 潤濕劑對顆粒制備的影響（略）

藥材提取物黏性較大，有一定吸濕性，不適合用水作為潤濕劑，選用適當濃度乙醇為潤濕劑。

因使用60%乙醇即可達到制粒要求，且乙醇用量少，節約成本，而且低濃度乙醇在工業生產中安全性高，所以60%乙醇為最優選擇。

2.4 制備工藝

稱取處方量益壽地仙顆粒凍干粉提取物，選用處方量的乳糖、蔗糖及微晶纖維素作為填充劑，過80目篩備用；慢慢加60%乙醇溶液混合均勻，同時不斷攪拌、制成軟硬適中的軟料，過14目篩制粒，將濕粒置于60℃干燥箱中干燥2h后，加入處方量硬脂酸鎂，同時慢慢加60%乙醇溶液混合均勻制軟材，過14目篩二次制粒，然后干燥，顆粒干燥后，過10目篩，整粒，包裝。

3 討論

冷凍干燥技術是一種使物料在低溫低壓下脫水的干燥工藝，與其它干燥方法相比，具有藥品不變質、易儲存、藥劑定量準確、脫水徹底、利于熱敏性藥物保持活性、揮發成分損失少等優點［4-6］，凍干工藝的應用，使得制備的藥物最大程度上保持活性，且干燥徹底，為制劑制備工藝及質量標準的制定奠定了基礎，但凍干技術要充分考慮優化凍干工藝、干燥效率，降低能耗及生產成本。藥材提取物黏性高、易吸潮，浸膏無法直接粉碎，浸膏二次制粒法為本次研究的制備方法具有抗粘、抗吸潮，外形美觀、流動性好等優點。

乳糖與蔗糖為稀釋劑及矯味劑，乳糖無臭且具有甜味、無吸濕性、性質穩定，蔗糖無臭且具有甜味，容易吸濕變潮，影響顆粒劑的成型性及吸濕性，但價格低廉。故兩者結合使用，可以使顆粒成型的條件下降低生產成本。中藥材提取物普遍有較強黏性，硬脂酸鎂的疏水性使其具有明顯的抗吸濕、抗黏作用，可以改善軟材黏度，便于制粒。微晶纖維素有賦形、黏合、吸水膨脹等作用，制備的顆粒成型性好，粒度硬，流動性好，且在水中溶化性好，崩解速度快等優點。

參考文獻

［1］李啟艷.至寶三鞭丸二次開發的研究［D］.山東中醫藥大學2004屆碩士學位論文，2004.

［2］國家藥典委員會中華人民共和國藥典［S］.二部.北京：化學工業出版社，2005.

［3］蕭三貫.最新國家藥用輔料標準手冊［M］.北京：中國醫藥科技電子出版社，2006:324.

［4］姚明春.藥品冷凍干燥技術的研究［J］.中國醫藥導報，2007，36(2):245-246.